细胞灌流培养与产物连续收获
应用场景:
在哺乳动物细胞(如CHO细胞)培养中,通过TFF实现细胞截留,延长培养周期并提高产物(如抗体、病毒载体)滴度。
操作流程:
- 系统配置:使用中空纤维膜包(如Repligen XCell ATF系统),膜孔径0.2 μm,截留细胞但允许代谢废物和产物通过。
- 灌流控制:蠕动泵以低流速(如10 mL/min)循环培养液,维持细胞密度至1×10^7 cells/mL。
- 产物收集:滤液中含有目标产物(如抗体),每日取样监测浓度并定期收集。
- 营养补充:根据消耗速率持续补加新鲜培养基,维持细胞活力。
优势:
- 培养周期可延长至30天以上,抗体产量提高3~5倍。
- 避免传统批次培养的频繁换液操作,降低污染风险。
注意事项:
- 需优化剪切力(泵速)以防止细胞损伤(CHO细胞通常耐受剪切力<50 dyn/cm²)。
- 定期监测膜堵塞情况(通过TMP升高判断),必要时进行反向冲洗(Backflush)。